外泌体表征方案

外泌体是细胞释放的膜结合囊泡,介导细胞间通讯,具有临床应用潜力,例如监测疾病进展和药物输送。然而,它们广泛的尺寸分
布,包括较大的囊泡,对传统的检测方法提出了挑战,传统的检测方法往往无法捕获真实的尺寸分布。
NanoCoulter™ 单颗粒分析仪采用经典的库尔特原理(电阻感应脉冲RPS),全球首创固体纳米孔技术,通过对单个纳米颗粒粒径、浓度、Zeta电位的测试,避开数据拟合产生的误差,可实现对外泌体的高精度、多维度和多参数综合表征,NanoCoulter™可以应用在外泌体行业的各个方面,从生产提取到分离纯化、鉴定,再到最终成品的研究应用,提供外泌体行业全方位的检测需求。

媲美电镜的粒径检测

NanoCoulter™ 单颗粒分析仪拥有极高的粒径测试精度,能够与电镜的精度相媲美,且对宽分布的样本也能够很好的测试,定量检测样本在不同粒径范围的分布情况。
下图为用NanoCoulter™ 测试的一外泌体样本,我们可以清晰的看到其粒径分布比例,大小颗粒同时存在,大部分颗粒粒径分布在70-90 nm范围,与统计的外泌体电镜数据高度一致。

外泌体大小分布与团聚检测

NanoCoulter™ 可精准测量外泌体样本中大囊泡的含量,搭配不同量程的芯片,得到不同粒径范围的颗粒浓度。超高灵敏度的单颗粒检测快速判断样本处理前后的微弱变化,快速推进外泌体的研究开发。

外泌体zeta电位精准表征

外泌体的Zeta电位是评估其稳定性、表面电荷特性及体内相互作
用的重要参数,直接影响其在生物体内的吸附、靶向递送及循
环时间。光学方法(DLS/NTA)通常只能提供体系平均电位信息,而NanoCoulter™ 可实现单颗粒的Zeta电位测量,精准解析外泌体群体中的异质性,助力外泌体治疗的研究和应用。

外泌体分离纯化方法评价

外泌体来源复杂,往往需要经过多次分离才能得到较纯净的外泌体。不同分离手段对外泌体的粒径和浓度会产生极大影响,借助
NanoCoulter™ 可快速准确的判断不同纯化方法的优劣性。

工程化外泌体研究

融合外泌体表征

将来自细菌的外囊泡与癌细胞的外泌体膜融合,能够同时赋予其细菌膜和癌细胞膜生物功能,构筑多功能递送系统。
通过NanoCoulter™ 对融合外泌体进行精确表征,可清晰呈现粒径分布、浓度及Zeta电位等关键指标,从而验证膜融合效果,为靶向药物或疫苗载体的开发提供可靠的数据支撑。

载药外泌体表征

在载药外泌体的开发与质量评估过程中,NanoCoulter™ 提供了强有力的单颗粒分析工具。其可精准测定外泌体的粒径分布、浓度及Zeta电位,帮助研究者评估药物负载效率、颗粒均一性及分散稳定性。相较于传统光学方法,NanoCoulter™ 不依赖荧光标记或折射率信息,对不规则颗粒和复杂体系具有更高的检测真实度,特别适用于工艺优化、批次一致性验证及靶向递送系统的研发。

外泌体细胞培养条件优化

在外泌体的细胞培养过程中,通常需先进行分离富集后再进行含量检测。若纯度不足或浓度偏低,往往无法满足下游研发需求,不得不重新培养,造成大量时间成本的浪费。因此,科研人员迫切需要一种准确、可靠且快速的检测方法,用于实时监控细胞在培养过程中的外泌体分泌水平,以提高实验效率。NanoCoulter™ 单颗粒分析仪正是为此类应用场景而设计,助力外泌体研发更加高效、精准,事半功倍。

During continuous cell culture over 7 days, exosome secretion was tracked, revealing the peak concentration on day 5.

外泌体纯度鉴定

Triton X-100是一种表面活性剂,可裂解外泌体的膜结构。可通过对比裂解前后外泌体样品的颗粒数变化,得到外泌体样本纯度。经Triton X-100处理,外泌体样品中颗粒数目明显下降,该样本纯度=(1-破膜后/破膜前)*100%=87.2%。该方法可快速实现外泌体纯度的定量检测。

外泌体保存条件研究

有研究者使用透射电镜对新提取的外泌体样本做了对比实验:
4 ℃保存4天后,粒径变化不大;-80 ℃保存4天后,外泌体粒径、形态发生较大变化,大颗粒急剧增多。
NanoCoulter™ 的粒径分布数据完美重现了这一结论,准确动态监测了保存温度对外泌体的影响情况。